эффективность разделения

 

Факторы нежелательны, так как снижают эффективность разделения. Их сумма о²п = о²_к + о²_в представляет собой дисперсию приборного уширения хромато­графической системы. Значение о²_п можно достаточно точно вычислить по ширине пика индивидуального соединения, элюирующегося из колонки с объемом, близким к V_t.

В эксклюзионной хроматографии до недавнего времени широко использовали колон­ки, набитые сорбентами с размером зерна 40-100 мкм (например, колонки со стирогелями зернением 37-75 мкм). Внутриколоночное размывание в этих колонках было достаточно большим, и во многих случаях для получения корректных результатов анализа требова­лось вводить поправку на приборное уширение. Современные колонки, заполненные сор­бентами с размером зерна 5-10 мкм, имеют значительно более высокую эффективность (до 50000 - 60000 т.т./м), значение о\ у них мало, а приборное уширение в значительной степени определяется внеколоночным размыванием. Поэтому при работе с такими колонками нужно обращать особое внимание на минимизацию мертвых объемов во всех внеколоночных коммуникациях.

Удобным критерием оценки разрешающей способности хроматографической систе­мы является отношение разделительной емкости Сг к корню квадратному из дисперсии приборного уширения Vo²_n [42]. При Сг/ Vo²_n >= 7 молекулярно-массовые характеристики, найденные из хроматограмм без учета приборного уширения, отличаются от результатов, полученных абсолютными методами, не более чем на 5% [21, 42]. Эффективность систе-

мы, необходимую для достижения указанной точности, предложено определять по формуле:

VN ------------------>=7,3

Ci / С₂ - igM

При этом компоненты, различающиеся по молекулярной массе на 5%, должны разде­ляться с коэффициентом разрешения не менее 0,09 [43].

Современные хроматографические системы, оптимизированные по селективному диапазону разделения, характеризуются эффективностью не менее 12000-15000 т.т. и значением Сг / Vo²_n >= 12-15. Такие параметры позволяют получать надежные харак­теристики ММР полимеров без учета приборного уширения. При очень узком ММР (Mw/Mn=< 1,1-1,2) поправка на приборное уширение необходима даже при использовании разделительных систем с очень высокой эффективностью. Комплекс проблем, связанных с приборным уширением и его влиянием на результаты эксклюзионно-хроматог-рафического анализа полимеров, подробно рассмотрен в монографиях [1-3].